подсчет эритроцитов в камере горяева ход работы

Содержание

Общая характеристика камеры Горяева

Приспособление представлено толстым стеклом, в котором расположены углубления. Они необходимы для залития биологической жидкости человека. Сверху помещается тонкое предметное стекло, которое способствует устранению пузырьков воздуха и распределению биологической жидкости по углублению.
Устройство позволяет подсчитывать количество лейкоцитов и эритроцитов с помощью микроскопа, направленного на углубление. Полученные данные подставляют в формулу, чтобы выявить число клеток в заданном объеме жидкости.

Под микроскопом врач-лаборант видит большие и малые квадраты, которые в сумме составляют 225. За одно исследование необходимо подсчитать клетки в 100 квадратах.

Обслуживание и уход за камерой Горяева

Чтобы приспособление выполняло свои функции, врач-лаборант правильно подсчитал форменные элементы, за ним необходимо ухаживать. Оно должно быть всегда чистым, стерильным. Наличие инородных предметов затруднит исследование.

В ходе работы при подсчете эритроцитов в камере Горяева выполняют следующие дезинфицирующие манипуляции:

  • с помощью марлевой салфетки, опущенной в спиртовой раствор, протирают все углубления камеры;
  • сухой марлевой салфеткой повторно протирают поверхность;
  • приспособление готово к работе, если с обеих его сторон появились радужные круги.

После окончания работы устройство дезинфицируют повторно:

  • биологическую жидкость удаляют;
  • камеру помещают в спиртовой раствор на полчаса, если используются другие дезинфектанты, время удлиняют до 60 минут;
  • приспособление достают, протирают насухо до появления радужных кругов;
  • стекло оставляют на сухой поверхности.

Алгоритмы подсчета эритроцитов в камере Горяева

Получают капиллярную кровь с помощью прокола скарификатором подушечки пальца. Важно, чтобы первая капля не попала в капилляр, так как в ней содержится тканевая жидкость и поврежденные эритроциты. Собирают кровь в капилляр.

Далее проводят манипуляция для проведения исследования с помощью камеры Горяева.

  • Кровь необходимо развести в 200 раз. Для этого используют раствор хлорида натрия.
  • Камеру подготавливают для проведения анализа, протирая её спиртовым раствором и сухой марлевой салфеткой. Нельзя использовать для этих целей вату, так как ее волокна могут остаться на стекле, что затруднит проведение анализа.
  • Покровное стекло ставится сверху камеры. Делают это аккуратно, чтобы оно точно встало в пазы.
  • Стеклянной палочкой берут немного образца биологической жидкости и подносят к отверстиям углублений. Кровь должна медленно распределиться по камере. Выжидают 1-2 минуты, чтобы исчезли пузырьки.
  • Микроскоп ставят на малое увеличение и подсчитывают количество эритроцитов в 80 малых квадратах сетки.
  • Полученное число подставляют формулу, рассчитывая количество красных кровяных телец на заданный объем биологической жидкости.

Метод является достаточно информативным, но возможны погрешности. Врач может ошибиться в подсчетах с помощью микроскопа, или взять объём жидкости, в котором находится недостаточно эритроцитов. Поэтому при появлении погрешностей или не точных результатов терапевт может назначить повторные исследования на полуавтоматическом анализаторе, который подсчитывает точное количество форменных элементов в 1 мл жидкости.

Достоинством метода является то, что врач может обнаружить другие образования помимо эритроцитов, что поможет выявить нарушения в организме.

Формула подсчета количества эритроцитов в камере Горяева

После получения количества красных кровяных телец, число необходимо подставить в формулу. С ее помощью подсчитывается число красных кровяных телец на заданный объем биологической жидкости.

X=(E×4000×200)/80

  • X – количество эритроцитов в заданном объеме биологической жидкости;
  • E – сумма эритроцитов, выявленная под микроскопом;
  • 200 – разведение крови;
  • 80 – число маленьких квадратов, в которых считали клетки.

Чтобы пересчитать эритроциты на 1 л крови, полученный результат умножают на 1012.

Подготовка к подсчету форменных элементов

Безусловно, в данном случае огромное значение имеет техника проведения лабораторного исследования. Конечно же, все поверхности камеры Горяева должны быть чистыми и сухими. После этого покровное стекло притирают так, чтобы можно было увидеть характерные радужные кольца. Крайне важно, чтобы в камере не было пузырьков воздуха, так как это может исказить результаты анализа.

Естественно, для того чтобы подсчитать количество форменных элементов, для каждой разновидности кровяных клеток используются разные реактивы. Например, для подсчета эритроцитов используется 0,9% раствор натрия хлорида. В пробирке нужно смешать 8 мл раствора соли и 0,02 мл крови. Так, лаборант разбавляет кровь в 400 раз. Иногда разведение может быть большим.

Для того чтобы подсчитать количество лейкоцитов, нужно смешать 0,4 мл уксусной кислоты (берут 3% или 5% раствор) и 0,02 мл крови.

После того как компоненты перемешаются в пробирке, с помощью специальной пипетки набирают небольшое количество смеси и аккуратно заполняют камеру для счета (как правило, одной или двух капель будет вполне достаточно).

Определение протромбинового времени.

Протромбиновый тест Квика характеризует процесс свёртывания крови при его запуске по внешнему механизму и имеет исключительное значение для определения активности фактора VII.

ЦЕЛЬ: ознакомиться с методикой.

ОСНАЩЕНИЕ: раствор тромбопластина (стандартный); 3,8% раствор цитрата натрия; 0,5% раствор хлорида кальция; капилляр Панченкова; пробирка, водяная баня или водяной термостат, поддерживающий температуру 37º С; секундомер.

ХОД РАБОТЫ: В капилляр Панченкова набирается раствор цитрата натрия до о, производится прокол пальца и в тот же капилляр (не удаляя цитрат натрия) набирается кровь, пока уровень набранной смеси не достигнет метки «0» («К»). Содержимое капилляра переносится в пробирку, которая помещается в водяную баню на 1 минуту.

В пробирку с цитратной кровью вносится раствор тромбопластина капилляром Панченкова, заполненным до метки «0» («К»), и такое же количество раствора хлорида кальция. Включается секундомер. Пробирка в водяной бане осторожно покачивается. Секундомер останавливается в тот момент, когда образуется сгусток крови. Полученное значение – «протромбиновое время» (ПВ).

Зная ПВ испытуемого (ПВИ) и нормальное протромбиновое время (ПВН), которое зависит от активности стандартного тромбопластина (оно бывает указано на флаконе, обычно 12 – 18 секунд; проверяется на нескольких образцах донорской крови), можно рассчитать протромбиновый индекс (ПИ): ПИ = ПВН / ПВИ * 100.

В норме ПИ составляет 90-100%. Чем больше протромбиновое время, свидетельствующее о гипокоагуляции крови, тем меньше значения протромбинового индекса.

Методика подсчета лейкоцитов

При ошибке анализатора помогает камера Горяева

Для подсчета лейкоцитов в крови в современных клинических лабораториях чаще всего используются специальные автоматические анализаторы, методика подсчета при помощи камеры Горяева относится к редко применяемым из-за своей трудоемкости и низкой скорости анализа. Для того, чтобы верно определить концентрацию отдельных видов лейкоцитов, требуется врач лабораторной диагностики или фельдшер-лаборант, владеющий навыками работы с микроскопом.

Подсчет при помощи камеры Горяева оправдан в тех случаях, когда автоматический анализатор не способен верно идентифицировать клетки крови пациента. Это случается при онкологических заболеваниях системы крови и некоторых других болезнях, при которых клетки имеют нетипичный вид и объем. К плюсам визуального подсчета относится возможность углубленной диагностики благодаря тому, что опытный врач способен отличить измененные клетки, характерные для отдельных патологий, и отразить их наличие в результатах анализа.

Лейкоциты должны быть подготовленными перед работой

Для подсчета отдельных видов лейкоцитов кровь разводят в несколько раз слабым раствором уксусной кислоты, при этом образцы без лейкоцитоза, как правило, следует разводить не менее чем в 20 раз, в случаях выраженного увеличения количества белых кровяных телец может потребоваться большее разведение. Для контрастирования изображения применяют окрашивание метиленовой синью.

После заполнения камер исследуемым объемом крови сверху накладывается покровное стекло сеткой и производится ее притирка, в ходе которой должны полностью исчезнуть пузыри воздуха между двумя стеклами. Заполненная камера помещается под микроскоп, причем целесообразно оставить ее неподвижной на 1-2 минуты для того, чтобы форменные элементы полностью прекратили движение и осели.

После этого на среднем увеличении (окуляр не менее чем х10) проводится подсчет отдельных видов лейкоцитов в не менее чем 100 квадратах. Для перевода получившегося числа в объемные значения необходимо умножить его на разведение (как правило, в 20 раз) и на количество квадратов, участвовавших в подсчете (чаще всего 100). Полученное число дает представление о количестве лейкоцитов в 1 мкл крови.

7.1. Электрические явления в сердце.

Физиологические свойства и особенности сердечной мышечной ткани. Современные представления о субстрате, природе и градиенте автоматии. Проводящая система сердца и ее роль. Характеристика электрической активности клеток миокарда

предсердий, желудочков и проводящей системы. Соотношение возбуждения, сокращения

и возбудимости миокарда. Реакция сердечной мышцы на дополнительные раздражения

(экстрасистолы).

Методы исследования электрической активности сердца: электрокардиография, векторкардиография, магнитокардиография. Анализ происхождения зубцов и интервалов на ЭКГ. Клиническое значение ЭКГ.

Вопросы программированного контроля по теме занятия.

  1. Свойства сердечной мышцы, особенности её сократимости?
  2. Что характерно для потенциалов действия кардиомиоцитов?
  3. Каково функциональное значение рефрактерности клеток миокарда?
  4. Какие причины обуславливают фазу плато потенциалов действия в сердце?
  5. Чем отличаются потенциалы действия в предсердиях и желудочках?
  6. Каковы функции проводящей системы сердца?
  7. Каковы основные причины спонтанной диастолической деполяризации?
  8. Какие ионы обеспечивают электромеханическое сопряжение в миокарде?
  9. О каких процессах и где позволяют судить данные электрокардиографии?
  10. Какой процесс и где отображает каждый зубец, интервал, сегмент ЭКГ?

Определение лейкоцитов в крови

Методика подсчёта лейкоцитов

Подсчёт количества лейкоцитов начинается с разведения крови в 3-5% растворе этановой кислоты с метиловой синью в 20 раз. Рабочий материал перед применением протирают марлей насухо.

Покровное стекло нужно протереть до возникновения цветных колец Ньютона. Далее, камеру заполняют разведённой кровью, при этом первые две капли выпускают на фильтровальную бумагу. Жидкость попадает в камеру благодаря капиллярному свойству воды. Важно проследить, чтобы в желобки при заполнении ничего не затекало. Если это произошло, жидкость аккуратно убирают фильтровальной бумагой. Затем оставляют сетку в покое на минуту, ожидая, пока ФЭ остановят своё движение.

Подсчёт лейкоцитов осуществляется в пределах ста больших квадратов при малом увеличении, то есть при окуляре 10х и объективе 8х, по правилу Егорова. Полученная цифра используется в формуле.

Х = (n× 250 × 20) / 100 или Х = n × 50

Х – количество лейкоцитов.

n – число, полученное в результате подсчёта в камере.

Количество лейкоцитов определяют, принимая во внимание число больших квадратов сетки – 100 и разведение крови – 20.


Как происходит подсчет лейкоцитов

Определение времени остановки кровотечения.

В норме время остановки кровотечения не превышает 4 мин. Удлинение при тромбоцитопениях и тромбоцитопатиях (нарушениях функциональных свойств тромбоцитов).

ЦЕЛЬ: ознакомиться с методикой.

ОСНАЩЕНИЕ: принадлежности для взятия крови, секундомер, стерильная фильтровальная бумага.

ХОД РАБОТЫ: производится прокол кончика пальца скарификатором. Включается секундомер, каждые 30 секунд фильтровальной бумагой снимается капля крови, выступившая самостоятельно (без надавливания). После остановки кровотечения секундомер останавливается, палец обрабатывается настойкой йода.

Изучение счетной камеры Горяева и заполнение ее кровью для подсчета эритроцитов и лейкоцитов

Количество эритроцитов и лейкоцитов подсчитывают в специальных счетных камерах. Для этой цели пользуются счетной камерой Горяева, которая представляет собой стекло с нанесенными на него двумя сетками. Сетки отделены одна от другой углублениями и делятся разграничительными линиями на 225 квадратов. Площадь сетки 9 мм2, высота, создающаяся при притирании шлифованного покровного стекла в камере, 0,1 мм, объем 0,9 мм3. Перед заполнением камеры кровью ее моют водой и насухо вытирают.

К сухой поверхности камеры притирают шлифованное покровное стекло, плавно продвигая его по ней взад и вперед до появления цветных колец Ньютона в местах соприкосновения покровного стекла со стеклом камеры. Затем кровь в смесителе встряхивают в течение 1-2 минут, после чего из смесителя выпускают на ватку 1-2 капли крови, следующую каплю помещают перед шлифованным покровным стеклом. При нанесении капли крови надо следить за тем, чтобы в пространство над сеткой камеры не попал воздух и чтобы не было избытка жидкости. Одну сетку заполняют для подсчета эритроцитов, вторую – для подсчета лейкоцитов.

Для заполнения камеры Горяева кровью, взятой по способу Н. М. Николаева (пробирочный метод), поступают следующим образом. К счетной камере притирают шлифованное стекло. Из каждой пробирки, предварительно встряхнув ее, с помощью стеклянной палочки с оплавленным концом берут по одной капле жидкости и заполняют ими раздельно обе сетки камеры, для чего каплю помещают перед щелью, образующейся между шлифованным стеклом и счетной камерой, в результате чего жидкость заполняет пространство над сетками.

Что такое камера Горяева, ее технические характеристики

Камера Горяева

Камера Горяева представляет из себя простое устройство для визуального подсчета форменных элементов крови под микроскопическим увеличением. Оно сконструировано на основе предметного стекла, имеющего специальные углубления для номинального объема крови, а также покровного стекла с нанесенной сеткой.

Различают несколько конструкций камеры Горяева в зависимости от количества камер (углублений для заполнения кровью), чаще всего в лабораториях применяются двухкамерные или четырехкамерные модели. Над каждой из камер находится специальная счетная сетка, нанесенная на покровное стекло методом лазерной гравировки либо при помощи микронапыления краски.

Приспособление сконструировано таким образом, что все имеющиеся камеры имеют равный объем, который указан в технической документации модели, их глубина и размеры секторов покровной сетки также стандартны. Это делает возможным переводить после подсчета форменных элементов их суммарные значения в единицы концентрации заданных клеток в объеме крови.

Методика подсчета эритроцитов

Соблюдение алгоритма позволяет произвести точный подсчет клеток

Исследуемую кровь разводят при помощи физиологического раствора минимум в 100 раз для того, чтобы стал возможен визуальный подсчет красных кровяных телец. При недостаточном разведении в камерах образуется двойной слой форменных элементов крови, что делает невозможным их определение. После наложения покровного стекла и притирки проводят микроскопирование препарата при увеличении окуляром х10. Подсчет ведется во всех 5 больших квадратах, разделенных линиями на 16 секторов. Расчет объемных значений проводят при помощи умножения полученного числа эритроцитов на степень разведения (чаще в 100 или 200 раз) и на 4000, затем проводят деление полученного числа на 80 (количество малых квадратов при подсчете). Полученное число характеризует количество эритроцитов в 1 мкл крови.

Определение времени свертывания крови.

Свёртывание крови in vitro обусловлено внутренним механизмом, запускаемым за счёт контактной активации фактора XII (Хагемана). В норме свёртывание капиллярной крови начинается через 0,5 – 2 минуты, заканчивается через 3 – 5 минут. Свёртывание крови, взятой из вены, составляет 5 – 10 минут.

ЦЕЛЬ: ознакомиться с определением времени свёртывания капиллярной крови визуальным методом.

ОСНАЩЕНИЕ: принадлежности для взятия крови, секундомер

ХОД РАБОТЫ: после прокола пальца, первая капля удаляется, в капилляр Панченкова набирается 25 мм крови, включается секундомер. Путём наклона капилляра на 45º кровь переводится на его середину, затем, через каждые 30 секунд, капилляр наклоняется на 45º в одну сторону, возвращается в горизонтальное положение, через 30 секунд наклоняется в другую сторону.

Вычисление цветного показателя (цветной коэффициент)

Цветной показатель выражает среднее содержание гемоглобина в одном эритроците. В норме цветной коэффициент равняется 1,0 при 100% гемоглобина и 5 000 000 эритроцитов в 1 мм3 крови. Его рассчитывают исходя из следующей пропорции: найденное количество гемоглобина (в единицах) так относится к его нормальному количеству, как найденное количество эритроцитов к их нормальному числу. Например, если найденный гемоглобин равен 88 ед., а количество эритроцитов 4 8000 000 в 1 мм3, то цветной показатель равен 0,91. Практически легче рассчитать цветной показатель упрощенным способом: путем умножения найденного количества гемоглобина на 5 и деления полученного произведения на первые три цифры подсчитанных эритроцитов.

При количестве эритроцитов меньше 1 000 000 делить надо на две первые цифры подсчитанного числа эритроцитов. Цветной показатель в норме равен 0,9-1,1.

Правило Егорова для подсчета форменных элементов

Правильный подсчет клеток в сетке

Подсчет форменных элементов крови ведется под микроскопом с применением соответствующего увеличения, чаще всего используется окуляр х10. Подсчитывают число клеток в тех больших квадратах, что разделены на 16 средних, начинают считать от верхнего левого и двигаются вниз направо, захватывая при подсчете 5 больших квадратов.

Для того, чтобы верно определить количество клеток в заданном объеме крови, необходимо исключить повторный подсчет тех форменных элементов, что располагаются на границах или узлах сетки. Такая ошибка привела бы к увеличению подсчитываемого показателя, для ее устранения было сформулировано правило Егорова. Оно гласит, что к данному квадрату относятся те элементы, что лежат в его пределах, не касаясь нанесенных линий, а также те клетки, что располагаются на верхней и левой сторонах квадрата. Те клетки, что «касаются» нижней или правой стороны, при подсчете учитываться не должны.

Как правильно рассчитать количество кровяных клеток?

Подсчет эритроцитов в камере Горяева осуществляется в пяти больших квадратах, что равно восьмидесяти малым. Для того чтобы избежать ошибки из-за неравномерного распределения образцов крови, выбирают квадраты, расположенные по диагонали. Отдельное внимание обращают на клетки, расположенные по краям, — здесь считают эритроциты на левой и верхней стенках, но не берут во внимание те, которые расположены на нижней и правой линиях.

Для того чтобы определить количество эритроцитов в миллилитре крови, число клеток в пяти больших квадратах умножают на 20 000 (при разведении в 400 раз).

Лейкоциты в камере Горяева считают по-другому. Здесь нужно вычислить количество элементов по меньшей мере в сотне больших квадратов. Полученное количество делят на 1600, после чего умножают на 4000, а затем на 20 (степень разведения).

Лейкоцитарная формула

Все виды лейкоцитов составляют лейкоцитарную формулу. По ней можно выявить определённые патологии. Нормы формулы меняются в зависимости от возраста и периода жизни человека. Сдвиг хорошо заметен у женщин во время беременности или после родов.

Применяются разные способы подсчёта соотношения видов этих клеток, но все они связаны с тем, что более тяжелые клетки (базофилы, например) располагаются ближе к краю мазка, а лимфоциты, как легкие клетки, остаются в середине.

  • Метод Филипченко. В данном способе подсчёт осуществляется по поперечной прямой границы одного конца к другому. Мазок при этом мысленно разделяют на три части.
  • Метод Шиллинга. Лейкоциты подсчитывают в четырех участках мазка.

Полученные данные записываются в таблицу. Индивидуально количество каждого вида белых клеток крови высчитывается по формулам. Отмечаются те элементы, которые попали в поле зрения. Счёт ведётся до того, момента, пока сумма всех подсчитанных клеток не составит 100.

Рефлекторные изменения кровенаполнения периферических сосудов.

ЦЕЛЬ РАБОТЫ: зафиксировать изменение ИНП, связанное с изменением кровенаполнения периферических сосудов

ХОД РАБОТЫ: надеть датчик на последнюю фалангу указательного пальца правой руки сидящего испытуемого. Подключить модуль «ОEM-OXI-CAB» к USB порту компьютера. Запустить программу «OXI_Test.exe». Подождать, пока появятся усредненные значения параметров, измеряемых пульсоксиметром и зафиксировать их.Поместить левую свободную от датчика руку в пластиковую ёмкость с холодной водой. Зафиксировать изменение показателей. Убрать ёмкость с водой, подождать восстановления исходных значений измеряемых показателей. Поднять правую руку с датчиком над головой. Зафиксировать показатели через несколько секунд после подъёма руки и через минуту.

ЧП Сатурация SpO2 ИНП
В покое
Левая рука в холодной воде
Правая рука поднята вверх
Пр. р. поднята вверх через 1 м.

Проанализировать изменения зарегистрированных параметров и сделать вывод.

Взятие крови в пробирки для подсчета эритроцитов и лейкоцитов по Н. М. Николаеву

Для каждого взятия крови берут две нумерованные пробирки, серологическую и агглютинационную. В серологическую пробирку помещают 4 мл 3% раствора хлористого натрия или реактива Гайема, а в агглютинационную – 0,4 мл 3 % раствора уксусной кислоты. В каждую пробирку вносят по 0,02 мл крови, взятой капилляром от гемометра, и тотчас же смешивают содержимое пробирок, вращая их между ладонями.

В серологической пробирке (для эритроцитов) получают разведение крови в 200 раз, а в агглютинационной (для лейкоцитов) – в 20 раз.

Описание сетки камеры Горяева

Сетка в камере Горяева

Покровное стекло имеет гравировку в виде сетки, большие квадраты которой имеют величину стороны в 1 мм. Чаще всего таких квадратов 9 над каждой счетной камерой, они расположены так, что образуют три столбца по три квадрата в каждом. Те большие квадраты, что располагаются по периферии, разделены на 16 квадратов поменьше, длина и ширина которых равны 0,2 мм. Стандартная глубина камеры под этими квадратами позволяет легко подсчитывать количество клеток в единицах объема, он равен для них 0,1 мм3 или 10-4 мл.

Большой квадрат, расположенный посередине, имеет дополнительные разделяющие линии, они нанесены так, что делят каждый из 16 средних квадратов еще на 16 самых маленьких. Их сторона равна 0,05 мм.

Норма лейкоцитов и отклонения

Норма лейкоцитов у людей составляет 4,0 – 9,0 × 10⁹/л. Или, по-другому, в 1 кубическом мм крови располагается примерно 6000 белых кровяных клеток.

На отклонения от нормы могут влиять внешние физиологические факторы:

  • приём пищи перед сдачей крови;
  • стресс;
  • беременность или менструация у женщин;
  • переохлаждение или перегрев;
  • большая физическая нагрузка перед сдачей анализов.

Если количество белых кровяных клеток превышает 9,0 × 10⁹/л (повышены лейкоциты), такое состояние называется лейкоцитозом. Подобную картину можно увидеть при злокачественных заболеваниях крови, инфекциях, поражениях радиацией и отравлениях.

Лекарственные препараты тоже способны увеличить количество лейкоцитов. Некроз тканей, обильные кровотечения, в том числе в результате операций, почечная кома, болезни сердца – всё это может привести лейкоцитозу.

Падение количества лейкоцитов ниже 3,9 × 10⁹/л называется лейкопенией. Однако у некоторых людей фиксируется постоянное число лейкоцитов в количестве 3,5 × 10⁹/л. Принято считать, что у таких людей сохраняется резерв этих клеток в тканях в 50 раз больше, нежели в крови. Еще встречается функциональная лейкопения после введения анальгетиков, сульфаниламидов и других лекарственных препаратов, после долгой мышечной работы, в результате поражения инфекциями и вирусами (тиф, грипп, корь).

Методика подсчёта лейкоцитов в моче

В моче подсчитывается количество лейкоцитов в камере Горяева по Нечипоренко. Этот анализ нужен для мониторинга заболеваний почек. Периодическое исследование мочи помогает проследить за правильностью лечения и эффективностью назначенной терапии.

Сбор мочи

В изучение идёт только первая утренняя моча в середине мочеиспускания. Для пациента важно следовать основным правилам сбора этого биоматериала. Специальной дополнительной подготовки для исследования не требуется.

Методика расчета

10 мл свежесобранной мочи центрифугируют в течение трёх минут при 2,5 тыс. оборотов в минуту. Перед этим необходимо проследить, чтобы моча, во избежание частичного распада клеток, имела слабокислую реакцию.

При помощи пипетки с узким оттянутым концом убирают верхний слой. В пробирке оставляют от 0,5 мл мочи до 1 мл в зависимости от объёма осадка.

Осадок аккуратно перемешивают с надосадочной жидкостью. Полученным раствором заполняют счётную камеру Горяева по схожему принципу, что используется при подсчёте ФЭ крови. Камеру оставляют в покое от 3 до 5 минут.

Лейкоциты необходимо подсчитать в больших квадратах по всей сетке с окуляром 7х и объективом 40х.

Полученная цифра используется в формуле:

Х = (а/0,9) × (1000/V)

Х – число лейкоцитов в 1 мл мочи.

а – подсчитанное количество, делённое на объём камеры в 1 мкл осадка мочи.

v – Количество мочи, взятой для исследования.

1000 – количество осадка.

Это важно! Норма лейкоцитов: в 1 мл мочи не более 2 × 10³ белых кровяных клеток.

Практические работы с модулем oem-oxi-cab .

Микролюкс «ОEM-OXI-CAB» является полностью законченным модулем для мониторинга основных параметров пульсовой оксиметрии. Модуль измеряет следующие параметры:

сатурация (SpO2),

частота пульса (ЧП),

индекс наполнения пульса (ИНП),

фотоплетизмограмму (ФПГ).

Сатурация SpO2 – различают два вида значений: текущее значение (измеренное за последний кардиоинтервал) и усредненное значение. На дисплее обычно отображается усредненное значение.

ЧП – различают два вида значений: текущее значение частоты пульса (измеренное за последний кардиоинтервал) и усредненное значение. На дисплее обычно отображаются оба значения.

ИНП – различают два вида значений: текущее значение (измеренное за последний кардиоинтервал) и усредненное значение. На дисплее обычно отображается усредненное значение. ИНП пропорционален степени модуляции оптического сигнала, обусловленного пульсацией крови (т.е. пропорционален количеству крови, пульсирующему в месте расположения датчика).

Индекс Перфузии (% mod) = ИНП / 20.

Диапазон измерения Индекса Перфузии будет от 0 до 12,5 % modс шагом 0,05 %mod.

Строение камеры

Камера Горяева представляет собой не что инное, как предметное стекло (но намного толще обычного), разделенное поперечными бороздами на три части. Средняя часть стекла содержит специальную сетку для подсчета. Крайние же части камеры служат для притирания покровного стекла — таким образом, по центру создается закрытая камера с капиллярными пространствами по бокам, через которые она и заполняется жидкостью.

Что же касается сетки, то камера Горяева разделена на 225 больших квадратов равных размеров — расположены они в пятнадцать рядов. 25 больших квадратов дополнительно разделены на меньшие, по 16 в каждом. Длина каждой стороны этого маленького квадратика составляет 0,05 мм.

Источники

  • 1. Общий анализ крови
  • 2. Методика подсчета эритроцитов, гемоглобина. Нормативы, патологические отклонения, диагностическое значение
  • 3. Диагностическое значение изменений в лейкоцитарной формуле
  • 4. Эозинофилия, базофилия и их диагностическое значение
  • 5. Методика определения СОЭ, диагностическое значение
  • ЛЕКЦИЯ № 22. Клиническое исследование крови. Нормальные показатели, патологические отклонения

    1. Общий анализ крови

    Забор крови для исследования производится утром натощак. Это связано с тем, что после приема пищи возникают физиологический лейкоцитоз, повышение уровня сахара.

    Любые манипуляции, связанные с контактом с кровью, должны производиться в резиновых стерильных перчатках. Кровь обычно берут из подушечки IV пальца левой руки. Предварительно кожу обрабатывают дезинфицирующим раствором спирта с эфиром, затем прокладывают кожу специальным скарификатором. Стерильным кусочком ваты удаляют первую каплю крови.

    Не рекомендуется производить надавливание на подушечку пальца: кровь должна поступать свободно. Забор крови производят в специальные стерильные пробирки. Если же необходимо приготовить мазок, каплю крови помещают на предварительно обезжиренное, чистое, сухое предметное стекло и готовят мазок. В общем анализе крови определяют содержание форменных элементов: эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов, лейкоцитарная формула, скорость оседания эритроцитов.

    Нормальное количество эритроцитов – 3,4–5,0 ? 1012 /л у женщин и 4,0–5,6 ? 1012 у мужчин. Уменьшение содержания эритроцитов носит название эритропений. Эритропении входят в состав анемий – состояний, при которых снижается уровень гемоглобина в крови. Снижение содержания эритроцитов – частый, но не обязательный признак. Изменение формы эритроцитов называется пойкилоцитозом. Он включает в себя овалоцитоз, шизоцитоз, сфероцитоз, акантоцитоз и др. Появление впериферической крови незрелых форм эритроцитов носит название ретикулоцитоза. Возможно появление анизоцитоза – изменения размеров эритроцитов, включающего в себя микроцитоз – размер эритроцитов не превышает 7 мкм, макроцитоз – эритроциты больше 8 мкм. Мегалоциты имеют размеры более 14мкм. Повышение содержания эритроцитов (эритроцитоз) встречается при сгущении крови или при эритремии – разновидности хронического лейкоза.

    СОЭ (скорость оседания эритроцитов) составляет 1-14 мм/ч у мужчин, 2-20 мм/ч у женщин. Повышение СОЭ встречается при воспалительных заболеваниях, системных заболеваниях соединительной ткани, туберкулезе, инфаркте миокарда, злокачественных новообразованиях и др.

    Гемоглобин: 130–175 г/л у мужчин, 120–160 г/л у женщин. Снижение уровня гемоглобина ниже этого уровня свидетельствует об анемии.

    Лейкоциты: 4,0–9,0 ? 109 /л. Повышение уровня лейкоцитов носит название лейкоцитоза, снижение – лейкопении.

    Нейтрофилы: палочкоядерные – 1–6 %, сегментоядерные – 47–72 %.

    Эозинофилы: 0,5–5 %.

    Базофилы: 0–1 %.

    Лимфоциты: 19–37 %.

    Моноциты: 3-11 %.

    Тромбоциты: 180–320 ? 109/л.

    Повышение количества тромбоцитов – тромбоцитоз – может носить относительный (вследствие сгущения крови) или абсолютный характер – при полицетемии (болезни Вакеза, хроническом лейкозе, сопровождающемся повышением уровня всех форменных элементов в результате активизации кроветворения) – как компенсаторная реакция на кровопотерю. Тромбоцитопения– снижение уровня эритроцитов – может возникать в ответ на угнетение кроветворения в костном мозге при лучевой болезни, может иметь аутоиммунный характер, возникать в результате механического разрушения тромбоцитов (спленомегалия) или возникать при опухолевом поражении костного мозга.

    2. Методика подсчета эритроцитов, гемоглобина. Нормативы, патологические отклонения, диагностическое значение

    Подсчет количества эритроцитов с помощью камеры Бюргера с сеткой Горяева. Для подсчета эритроцитов необходимы камера Бюргера с сеткой Горяева, исследуемая кровь, 3,5 %-ный раствор натрия хлорида, микроскоп с объективом 40 и окуляром 7, стерильные пробирки.

    Предварительно покровное стекло плотно притирают к камере. Кровь перед исследованием разводят в специальном растворе натрия хлорида из расчета 200: 1. По принципу капиллярности кровь распространяется под покровным стеклом в счетной камере. Счетная камера представляет собой толстое стекло с двумя счетными сетками. Счетная сетка Горяева в камере Бюргера представлена большими и малыми квадратами. Больших квадратов 225, 25 больших квадратов поделены на малые. Каждый большой квадрат содержит 16 малых. Эритроциты могут быть расположены в малых квадратах и на границе между квадратами. Для подсчета выбирают эритроциты внутри квадрата и по двум границам (например, верхней и правой или нижней и левой).

    Эритроциты подсчитывают в пяти больших квадратах, разделенных на малые. Нормальное содержание эритроцитов – 3,4–5,0 ? 1012 /л у женщин и 4,0–5,6 ? 1012/л у мужчин. Также определяются незрелые формы эритроцитов – ретикулоциты. В норме в периферической крови они отсутствуют. Их появление свидетельствует об активации эритропоэза в красном костном мозге. Это явление может возникать как компенсаторная реакция при кровопотерях или гемолизе эритроцитов. Повышение количества эритроцитов носит название эритроцитоза, уменьшение – эритропении. Эритропении могут встречаться в рамках анемий, а эритроцитозы имеют наследственный или приобретенный характер. Приобретенные эритроцитозы возникают из-за сгущения крови вследствие потери жидкости при диарее, рвоте или других случаях. Кроме того, эритроцитоз может быть проявлением истинной полицитемии, хронического лейкоза, при котором резко усиливается костномозговое кроветворение, увеличивается концентрация всех форменных элементов в единице крови.

    Определение уровня гемоглобина. В норме количество гемоглобина составляет 130–175 г/л у мужчин, 120–160 г/л у женщин. Уменьшение количества гемоглобина в единице крови носит название анемии. Причинами анемии могут быть острая или хроническая потеря крови (постгеморрагические анемии). Другая группа анемий связана с нарушением кроветворения в красном костном мозге (дизэритропоэтические анемии). Анемии могут быть связаны с гемолизом эритроцитов, могут быть приобретенными или врожденными.

    Анемии могут классифицироваться по разным признакам.

    1. По степени регенераторной активности:

    1) гиперрегенераторные;

    2) гипорегенераторные;

    3) регенераторные;

    4) арегенераторные.

    2. По цветовому показателю:

    1) гиперхромные, если цветовой показатель превышает 1,05;

    2) нормохромные, если цветовой показатель находится в промежутке 0,85-1,05;

    3) гипохромные, если цветовой показатель менее 0,85.

    3. По размеру эритроцитов:

    1) микроцитарные;

    2) макроцитарные;

    3) мегалоцитарные;

    4) нормоцитарные.

    3. Диагностическое значение изменений в лейкоцитарной формуле

    Общий анализ крови предполагает не только определение количества форменных элементов, в том числе и лейкоцитов, но и вычисление лейкоцитарной формулы, т. е. выяснение процентного содержания отдельных форм лейкоцитов. Обычно в лейкоцитарной формуле учитывают содержание нейтрофилов (а среди них юных, палочкоядерных, сегментоядерных), лимфоцитов, моноцитов, базофилов, эозинофилов. Количество их указывают в лейкоцитарной формуле в процентном соотношении, принимая общее количество лейкоцитов за 100 %. Поскольку каждая форма лейкоцитов имеет определенные функции в организме, изменение их количества имеет большое диагностическое значение.

    Нейтрофильный лейкоцитоз

    Это достаточно частая реакция белой крови на различные вос-палительные и инфекционные процессы в организме. Очень часто нейтрофильным лейкоцитозом сопровождаются гнойно-воспалительные процессы в организме, причем тяжесть процесса отражает степень лейкоцитоза. Обычно лейкоцитоз сопровождается увеличением количества юных и палочкоядерных нейтрофилов и носит название сдвига лейкоцитарной формулы влево. Это благоприятный признак, свидетельствующей об активной борьбе организма с инфекцией. Увеличение содержания сегментоядерных лейкоцитов называется сдвигом лейкоцитарной формулы вправо. Он свидетельствует о низкой регенераторной активности костного мозга.

    Лейкоцитоз может быть и физиологическим явлением, тогда он возникает после приема пищи, стресса. Характерны лейкоцитоз беременных, а также ортостатический лейкоцитоз (возникающий при переходе тела в вертикальное положение). Лейкоцитоз может встречаться при онкологических заболеваниях или длительных интоксикациях организма. Уменьшение содержания нейтрофилов (нейтропения) наиболее часто является причиной лейкопении. Она может носить наследственный характер или встречаться при лучевой болезни, воздействии на костный мозг лекарственных и химических веществ, иметь аутоиммунную природу. В некоторых случаях лейкопения может встречаться при лейкозах.

    Лимфоцитоз – увеличение содержания лимфоцитов. Причиной этого состояния нередко являются инфекционные заболевания, например вирусный гепатит, коклюш, краснуха, инфекционный мононуклеоз. Достаточно часто повышение уровня лейкоцитов свидетельствует о таких заболеваниях, как туберкулез, сифилис. Другой грозной причиной лимфоцитоза может быть лимфолейкоз. Уменьшение содержания лимфоцитов (лимфопения) может быть одним из признаков лучевой болезни. Это связано с подавлением активности костного мозга под воздействием ионизирующей радиации.

    Моноцитоз (увеличение уровня моноцитов) возникает при некоторых бактериальных заболеваниях, например септическом эндокардите, туберкулезе, малярии, сифилисе. Иногда моноцитоз встречается при системных заболеваниях соединительной ткани. Сочетанное увеличение лимфоцитов и моноцитов может свидетельствовать об инфекционном мононуклеозе. Снижение уровня моноцитов носит название моноцитопении и возникает при тяжелых инфекционных заболеваниях, например сепсисе.

    4. Эозинофилия, базофилия и их диагностическое значение

    Эозинофилией называют увеличение процентного содержания эозинофилов в лейкоцитарной формуле. Нормальное количество эозинофилов составляет 0,5–5 %. Очень важно, что причина эозинофилии может быть связана со злокачественным процессом (лимфогранулематозом или лейкозом). Их увеличение нередко свидетельствует об аллергическом процессе в организме: аллергическом дерматите, сывороточной болезни, бронхиальной астме, аллергической крапивнице и отеке Квинке, поллинозах, лекарственной и бытовой аллергиях.

    Степень увеличения содержания эозинофилов позволяет оценить степень выраженности аллергического процесса. Подобная реакция белой крови объясняется тем, что одной из функций эозинофилов является устранение нежелательных эффектов за счет инактивации токсических продуктов, возникающих при гибели паразитов, и гистамина, который играет одну из главных ролей при реализации аллергических реакций.

    Значительное повышение уровня эозинофилов связано с сенсибилизацией организма при наличии гельминтов (при аскаридозе, описторхозе, дифиллоботриозе и др.) или простейших (при амебиазе, малярии), но иногда возможно и при носительстве паразитов в организме (например, эхинококка, трихинелл). Иногда эозинофилия возникает при системных заболеваниях соединительной ткани. Повышение содержания эозинофилов может возникать при применении ряда лекарственных препаратов (ацетилсалициловой кислоты, нестероидных противовоспалительных средств, препаратов золота). Снижение их уровня (иногда до полного отсутствия) связано с интоксикацией организма, тяжелыми заболеваниями: туберкулезом, сепсисом.

    Базофилия

    Нормальное содержание базофильных лейкоцитов в периферической крови составляет 0–1 %. Базофилия (увеличение содержания базофилов в лейкоцитарной формуле) происходит крайне редко. Это явление связано с сенсибилизацией организма при аллергических заболеваниях (например, при наличии отека Квинке, крапивницы, аллергического дерматита, поллинозов, сывороточного дерматита и др.). Базофилия нередко встречается при опухолевых заболеваниях, например хроническом миелолейкозе.

    5. Методика определения СОЭ, диагностическое значение

    CОЭ в норме составляет 2-20 мм/ч у женщин и 1-14 мм/ч умужчин. Определения СОЭ проводится по методу Панченкова. Для исследования используют специальный градуированный капилляр, названный по имени ученого. Кровь набирается в него самостоятельно, по принципу капиллярности. Он имеет 100 делений, цена деления составляет 1 мм, ширина капилляра также 1мм.

    Для исследования кровь набирают дважды, каждый раз до 100 мл, а затем смешивают ее с раствором 5 %-ного цитрата натрия. Объем цитрата натрия составляет 50 мл. Затем смешивают кровь с раствором цитрата и вновь набирают получившийся раствор (смесь крови и цитрата натрия) в капилляр и ставят его в штатив, заметив время. Через 1 ч проверяют результат. Количество делений, соответствующих отстоявшейся плазме, и соответствует скорости оседания эритроцитов, измеряемой в миллиметрах в час.

    На скорость оседания эритроцитов влияют различные факторы: концентрация эритроцитов в единице крови (сгущение крови сопровождается уменьшением СОЭ), наличие белков, содержащихся в крови и способствующие более быстрому оседанию эритроцитов. Поэтому анемии, сопровождающиеся уменьшением эритроцитов в единице крови, проявляются повышением СОЭ, аполицитемия, (сгущение крови), наоборот, – ее уменьшением. Именно этим явлением объясняется увеличение СОЭ при разнообразных воспалительных процессах в организме. Кроме этого, способствовать оседанию эритроцитов могут злокачественные опухоли или распад тканей (например, при инфаркте миокарда). Туберкулез, системные заболевания соединительной ткани, острая ревматическая лихорадка всегда сопровождаются повышением СОЭ. Кроме того, степень ее увеличения позволяет оценить степень активности патологического процесса, что необходимо для правильного выбора тактики лечения.

    Закладка Постоянная ссылка.

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *